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產(chǎn)品簡介
產(chǎn)品名稱 ：大鼠陰道上皮細(xì)胞
產(chǎn)品品牌 ：通蔚生物
組織來源 ：陰道組織
產(chǎn)品規(guī)格 ：5×105cells/T 25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
細(xì)胞簡介
大鼠陰道上皮細(xì)胞分離自陰道組織；陰道位于膀胱、尿道和直腸之間，是一個富有彈性的管狀器官。它在人類生殖過程中具有多種生理功能，是連接子宮與外陰的通道，是排出月經(jīng)血、娩出嬰兒的必經(jīng)之路，也是一個重要的性交器官。陰道壁按組織學(xué)由外到內(nèi)分三層，即黏膜層、肌層和外膜，陰道黏膜是最外層，也就是最淺表的那一層，相當(dāng)于皮膚的最外面層一樣。陰道上皮呈粉紅色，表面為復(fù)層鱗狀上皮，但無角化層。在正常的月經(jīng)周期中，陰道上皮脫落的上皮細(xì)胞的形態(tài)隨著卵巢內(nèi)分泌的變化而改變，因此通過陰道脫落上皮的病理檢查便可以初步判斷卵巢的內(nèi)分泌功能狀況。陰道粘膜是指陰道內(nèi)壁分泌的保持陰道內(nèi)壁表面濕潤，保持表面活力的粘液膜層，因為其表面多粘稠，故為粘膜。
在卵泡期，陰道粘膜受雌激素作用，上皮增厚，表皮細(xì)胞角化；陰道上皮細(xì)胞內(nèi)糖原豐富(注：陰道粘膜上皮是復(fù)層扁平上皮又名“復(fù)層鱗狀上皮”)，在陰道桿菌作用下分解為乳酸，保持陰道的酸性環(huán)境；排卵后，受孕激素作用，陰道粘膜上皮大量脫落，角化現(xiàn)象消失。
方法簡介
通蔚生物實驗室分離的大鼠陰道上皮細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶 。
質(zhì)量檢測
通蔚生物實驗室分離的大鼠陰道上皮細(xì)胞經(jīng)C ytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90% 以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息
包被條件 ： 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm 2)
培 養(yǎng) 基 ：含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 ：每2-3天換液一次
生長特性 ：貼壁
細(xì)胞形態(tài) ：上皮細(xì)胞樣
傳代特性 ：可傳1-2代
傳代比例 ：1:2
消 化 液 ：0.25% 胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 ：氣相：空氣，95% ；C O2，5%
大鼠陰道上皮細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用通蔚生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時發(fā)送細(xì)胞電子版照片
使用方法
大鼠陰道上皮細(xì)胞是一種貼壁細(xì)胞，細(xì)胞形態(tài)呈上皮細(xì)胞樣，在通蔚生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下，細(xì)胞可傳1-2代；建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實驗。
客戶收到細(xì)胞后，請按照以下方法進(jìn)行操作。
1.取出T 25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用75% 酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5% C O 2飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2.貼壁細(xì)胞消化
1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次。
2) 添加0.25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后，再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5m L，置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
3. 細(xì)胞實驗
因原代細(xì)胞貼壁特殊性，貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時，需要對實驗器皿進(jìn)行包被，以增強細(xì)胞貼壁性，避免細(xì)胞因沒貼好影響實驗；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1m g/m l），明膠（0.1% ），依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被。
注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和通蔚生物技術(shù)部溝通。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，詳盡告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
