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021-54845833/15800441009
293T/17人胚腎細胞
基本信息
產品品牌 ：通蔚生物
中文名稱 ：人胚腎細胞
細胞簡稱 ：293T /17
細胞別稱 ：HEK 293T /17;293T /17
細胞形態 ：上皮細胞樣
生長特性 ：貼壁細胞
培養環境 ：空氣，95% ；CO2，5% 37℃
凍存條件 ：55% 基礎培養基+40% FBS+5% D M SO液氮
完全培養基 ：DM EM (PM 150210)＋10% F B S(164210-50)＋1% P /S(P B 180120)
傳代步驟
1、吸出原培養液。
2、加入2ml左右PBS，輕輕晃動培養瓶潤洗細胞,吸出PBS丟棄。
3、加入1ml左右0.25% 胰蛋白酶溶液（含ED TA ），輕輕晃動培養瓶使之浸潤所有細胞。
4、放入培養箱消化，顯微鏡下看到細胞塊中間的細胞明顯變圓有間隙時可終止，全程不要拍打培養瓶。
5、加入3ml含血清的培養基終止消化，吹打細胞使之脫壁并在液體里反復吹打使細胞盡量呈單顆細胞的懸浮液。
6、收集細胞懸液離心，1200rpm /min 3分鐘，離心完吸出上清丟棄。
7、加入新鮮培養基，吹打幾下混勻細胞即可，按比例接種到新培養瓶，補足培養基，擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進行培養。
消化時間 ：0.5~ 1分鐘
換液頻次 ：2~ 3次/周
傳代比例（密度） ：1:3-1:4
收貨注意事項
若收到細胞大片脫落，請按照如下處理方式處理
1、將培養瓶內所有培養基 轉入無菌離心管，離心收集細胞（1200rpm 3min）去除舊培養基。
2、用 PBS 重懸細胞，將所有細胞收集到一個離心管中，再次離心（1200rp m 3min）去除PBS。
3、加入1ml左右0.25% 胰酶重懸細胞，混勻即可，不能吹打太多次，放入培養箱消化3分鐘。
4、消化好后，用移液槍輕輕吹打細胞懸液，使細胞團分散，迅速加入3-5ml含血清的培養基混勻以終止消化，離心（1200rpm3min）去除胰酶。
5、加入5ml左右的細胞相應的完全培養基混勻，按比例接入無菌培養瓶/皿中（首次傳代推薦1:3）。
細胞背景描述
293T /17細胞株是293T 細胞株的衍生株，293T 是293 [H EK -293]細胞株插入了SV 40 T-antigen的溫度敏感基因形成的高轉衍生株。293T細胞進行克隆，檢測pBN D 和pZ A P載體，得到一株能生成高滴度感染逆轉錄病毒的衍生株293T /17細胞。293T /17細胞持續表達猿病毒40(SV 40)大T 抗原，而因其高轉染能力篩選到17號克隆。293T /17細胞用pC RIPenv-和pC RIPgag-2載體轉染得到A N JO U 65細胞株，A N JO U 65細胞再用pC R IPgag-2和pG PT 2E載體轉染得到親宅性外殼表達細胞株BO SC 23。A N JO U 65細胞用攜帶gpt抗性基因的pC RIPA M gag載體轉染得到Bing雙向性表達包裝細胞株。
供體年齡 ：胚胎
組織來源 ：腎
細胞類型 ：轉化細胞系
生物安全等級 ：2
細胞保藏中心 ：ATCC ; C R L-11268
收到常溫細胞后如何處理
細胞培養詳細操作步驟請參照通蔚生物細胞培養操作指南
1. 收到常溫細胞后，及時拍照記錄有無漏液/瓶身破損現象。
2. 用75%酒精擦拭細胞培養瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。先不要打開培養瓶蓋，將細胞置于細胞培養箱內靜置培養2-4小時，以便穩定細胞狀態。
3. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細胞形態、所用基礎培養基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4. 靜置完成后，取出細胞培養瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態（所拍照片 將作為后續服務依據）；建議細胞傳代培養后，定期拍照、記錄細胞生長狀態。
5. 若觀察到異?；蛘邔毎幸蓡枺埣皶r跟我們聯系；對于細胞培養操作及培養?？筛覀兊募夹g支持交流。
售前須知
該細胞貼壁松散，操作時請盡量輕柔；換液時需預熱培養基；收貨如有大塊脫落的細胞團，為正常現象，請按照收貨注意事項處理。
