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品質保證 · 通蔚試劑

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產品中心

  • 耶氏肺孢子蟲PCR試劑盒

    規格:
    • 品牌 : 通蔚生物
    • 目錄號 : TW36101
    • 應用 : 僅供科研使用
    • 保存條件 : 低溫/避光保存
    • 貨期 : 現貨
    • 商品庫存:100
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耶氏肺孢子蟲PCR試劑盒
產品及特點:
肺孢子蟲(Pneumocystis)是一種重要的機會致病性病原體,寄生于人和多種哺乳動物肺組織內,引起肺孢子蟲肺炎(Pneumocystis pneumonia,PCP)或稱肺飽子蟲病(Pneumocystosis)。目前將寄生于鼠類的稱為卡氏肺孢 子 蟲 (Pneumocystis carinii) ,寄生人體者稱為耶氏肺 孢 子 蟲(Pneumocystis jiroveci)。該蟲可在免疫功能低下的人群中誘發致命性的肺孢子蟲肺炎(PCP)。本產品是根據 PCR 原理開發的耶氏肺孢子蟲檢測試劑盒,它具有下列特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供DNA模板。
2. 引物經過精心優化,專一性強,只擴增耶氏肺孢子蟲,與其他病原沒有交叉反應。
3. 提供陽性對照,便于區分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料,PCR后可以直接上樣電泳。
規格及成分:

編號

成分

規格

試劑一

PCR MagicMix 3.0

1 mL(紅蓋)

試劑二

超純水

1 mL(亮黃色)

試劑三

耶氏肺孢子蟲 PCR 引物混合液

100 μL(白蓋)

試劑四

耶氏肺孢子蟲 PCR 陽性對照(1×10E8 /μL)

50 μL(黃蓋)

試劑五

使用手冊

1 份

運輸及保存:
低溫運輸,-20℃保存,保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置,不要污染其他試劑。
自備試劑:
樣品 RNA。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備:
1. 用自選方法純化N+2個樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數核酸提取試劑盒兼容。可以選用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N個樣品,則需要做N+2個提取,包括一個樣品制備陽性對照和一個樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在適量水(取決于試劑盒要求的樣品起始量)中加 10μL 耶氏肺孢子蟲 PCR 陽性對照的 1000 倍稀釋液而得,樣品制備陰性對照是直接用水。提取結束后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、設置 PCR 反應(40μL 體系):
3. 對N+2個樣品,在PCR時需要增加一個PCR陽性對照和一個PCR陰性對照,故需要設置N+4個反應。在N+4個PCR管中分別加入下列成分:

編號

成分

規格

試劑一

PCR MagicMix 3.0

1 mL(紅蓋)

試劑二

超純水

1 mL(亮黃色)

試劑三

耶氏肺孢子蟲 PCR 引物混合液

100 μL(白蓋)

試劑四

耶氏肺孢子蟲 PCR 陽性對照(1×10E8 /μL)

50 μL(黃蓋)

試劑五

使用手冊

1 份

4. 按下表設置 PCR 反應:

過程

溫度

時間

預變性

95℃

5 min

PCR 反應35個循環

95℃

30 sec

55℃

30 sec

72℃

40 sec

延伸

72℃

7 min

三、電泳檢測:
5. 取 10-20 μL PCR 產物。電泳檢測 PCR 產物。本產品提供的 PCR Mix 在 擴增結束后可以直接上樣,不需要另外再加 loading buffer。PCR 產物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現,陰性對照必須無任何擴增,否則實 驗無效。對沒有擴增產物的樣品,可以稀釋 10 倍后重復 PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。
四、特別提示:
本公司的所有產品,僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!
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