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品質保證 · 通蔚試劑

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產品中心

  • HIV-1前病毒PCR試劑盒

    規格:
    • 品牌 : 通蔚生物
    • 目錄號 : TW36729
    • 應用 : 僅供科研使用
    • 保存條件 : 低溫/避光保存
    • 貨期 : 現貨
    • 商品庫存:100
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HIV-1前病毒PCR試劑盒
產品及特點:
人類免疫缺陷病毒1型(HIV-1)患者血漿中病毒 RNA 水平一直以來是評判抗病毒治療效果或預測疾病進展的重要指標。但是,經抗病毒治療后血漿 HIV-1RNA 已達到基線水平感染者的血液、精液或淋巴結中仍可以檢測到 HIV-1原病毒 DNA 的存在,構成病毒儲藏庫,對清除 HIV-1病毒構成嚴重阻礙。所以在病毒載量已經檢測不到的情況下,HIV-1原病毒 DNA 水平可以作為除 CD4+T細胞計數和病毒載量之外的另一標志物。
本產品就是針對此需求而建立的一種檢測 HIV-1原病毒 DNA 的 PCR 檢測方法,該種方法還可用于 HIV-1病毒儲藏庫中 HIV-1原病毒 DNA 的檢測。 
1. 即開即用,用戶只需要提供DNA模板。
2. 引物經過精心優化,專一性強,只擴增HIV-1前病毒,與其他病原沒有交叉反應。
3. 提供陽性對照,便于區分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料,PCR后可以直接上樣電泳。
5. 本試劑盒足夠做40μL體系的PCR 50次,但只能用于科研。
規格及成分:

編號

成分

規格

試劑一

PCR MagicMix 3.0

1mL(紅蓋)

試劑二

超純水

1mL(亮黃色)

試劑三

HIV-1前病毒PCR引物混合液

100μL(白蓋)

試劑四

HIV-1前病毒PCR陽性對照(1×10E8 /μL)

50μL(黃蓋)

試劑五

使用手冊

1 份

運輸及保存:
低溫運輸,-20℃保存,保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置,不要污染其他試劑。
自備試劑:
樣品 DNA。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備:
1. 用自選方法純化N+2個樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數核酸提取試劑盒兼容。可以選用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N個樣品,則需要做N+2個提取,包括一個樣品制備陽性對照和一個樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在適量水(取決于試劑盒要求的樣品起始量)中加 10μL HIV-1前病毒 PCR 陽性對照的 1000 倍稀釋液而得,樣品制備陰性對照是直接用水。提取結束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、設置 PCR 反應(40μL 體系):
3. 對N+2個樣品,在PCR時需要增加一個PCR陽性對照和一個PCR陰性對照,故需要設置N+4個反應。在N+4個PCR管中分別加入下列成分:

成份

N+2個樣品管

PCR陰性對照

PCR陽性對照

PCR Magic Mix 3.0

20μL

20μL

20μL

HIV-1前病毒PCR引物混合液

2μL

2μL

2μL

N+2個樣品DNA模板

18μL

--

--

PCR陰性對照(水)

--

18μL

--

PCR陽性對照(HIV-1前病毒PCR陽性對照1000倍稀釋液)

--

--

18μL

4. 按下表設置 PCR 反應:

過程

溫度

時間

預變性

95℃

5 min

PCR反應35個循環

95℃

30 sec

55℃

30 sec

72℃

40 sec

最后延伸

72℃

7 min

三、電泳檢測:
5. 取 10-20 μL PCR 產物。電泳檢測 PCR 產物。本產品提供的 PCR Mix 在 擴增結束后可以直接上樣,不需要另外再加 loading buffer。PCR 產物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現,陰性對照必須無任何擴增,否則實 驗無效。對沒有擴增產物的樣品,可以稀釋 10 倍后重復 PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。
四、特別提示:
本公司的所有產品,僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!
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