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最新產(chǎn)品

  • 動物組織直擴(kuò)PCR試劑盒

    規(guī)格:
    • 品牌 : 通蔚生物
    • 目錄號 : TW36944
    • 應(yīng)用 : 僅供科研使用
    • 貨期 : 現(xiàn)貨
    • 規(guī)格 :80T
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動物組織直擴(kuò)PCR試劑盒
描 述:
RAPA3G DNA 聚合酶為經(jīng)電子重構(gòu)架的第三代 TaqDNA 聚合酶,第三代 DNA 聚合酶具有高度的雜質(zhì)耐受性、長片段擴(kuò)增能力、高擴(kuò)增成功率、高產(chǎn)量,這些特點(diǎn)使得RAPA3G 系列產(chǎn)品可用于粗制樣品的直接擴(kuò)增,無需核酸純化步驟。該 PCR Mix 具有 5’-3’的聚合酶活性、5’-3’的外切酶活性、3’-5’的外切酶活性,產(chǎn)物部分帶有”A“尾巴,部分為平末端,因此產(chǎn)物可用于 TA 克隆或平端克隆。
特點(diǎn)和用途:
1)高雜質(zhì)耐受性:該 PCR Mix 可直接使用血液、蛋白含量較高的動物組織材料進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增,無需基因組提取。
2)高效的快速 DNA 釋放劑:盡管該 PCR Mix 可以直接使用組織細(xì)胞材料進(jìn)行擴(kuò)增,但我們?nèi)匀煌扑]采用 DNA 釋放劑進(jìn)行樣本的快速前處理(約需要 5min,可高通量操作)。DNA 釋放劑的前處理,使得制備的 DNA 模板可以進(jìn)行多次、多基因擴(kuò)增,并長期保存 DNA,經(jīng) DNA 釋放劑處理的樣本,在室溫條件下放置 1 個月,無任何后續(xù)影響,-20 可長期保存。
3)快速 PCR:該酶具有 6kb/min 以上的擴(kuò)增速度,可顯著的縮短 PCR 的擴(kuò)增時間,在常規(guī)測試條件下,10s 的延伸時間可完成 1kb 的基因組 DNA 擴(kuò)增。
4)粗制樣品的擴(kuò)增能力:擴(kuò)增能力>4kb。
5)高保真性能:該制品包含一定比例的 RAPA HiFi 超保真 DNA 聚合酶,因此其具有一定的保真性能(經(jīng)藍(lán)白斑測試,其保真性能約為 Taq DNA 聚合酶的 56 倍)。
6)熱啟動,防止非特異性擴(kuò)增:RAPA3G 系列產(chǎn)品均采用 HaiGene 專有的熱啟動技術(shù),確保 50 度以下完全無活性,僅有 95 度加熱 5min 以后才能恢復(fù)其活性,因此可最大限度的提高擴(kuò)增的特異性,減少非特異性產(chǎn)物的產(chǎn)生。

使用方法:
1. DNA 釋放:
(1)采用加熱法:取 2-10 個毛發(fā)囊、1-10mg 動物組織等材料,放入到 0.2ml EP 管中,加入 50 μl 快速 DNA 釋放劑A,于 PCR 儀中 98°C 加熱 5min,加熱完畢后加入 50 μl快速 DNA 釋放劑 B,混合均勻,即可使用。
(2)采用鋼珠研磨法:取 1-10mg 動物組織等材料,放入到 2ml EP 管中,加入 250 μl 快速 DNA 釋放劑 A 和 2-3 粒鋼珠,研磨 1-2min 成漿體裝。研磨完畢后加入 250 μl 快速DNA 釋放劑 B,混合均勻,即可使用。
2. 按下表配制 PCR 反應(yīng)體系并混合均勻:

請 注 意:
(1)該制品為熱啟動制品預(yù)變性步驟 5min 不可縮短,否則 DNA 聚合酶無法恢復(fù)活性。
(2)當(dāng)擴(kuò)增片段<1kb時,延伸時間使用 15s;擴(kuò)增片段 1-2kb 時,延伸時間使用45s,擴(kuò)增片段 2-3kb 時,延伸時間使用 1min,當(dāng)擴(kuò)增片段>3kb 時,請按照 2kb/min 的延伸時間進(jìn)行設(shè)置。
(3)盡管該酶具有 6kb/min 的延伸速度,但按照 2kb/min 設(shè)置延伸時間的條件下,能獲得最高的產(chǎn)量。
注意事項:
(1)當(dāng)模板 GC 含量>70%時,請?zhí)砑?× Q-Solution。
(2)當(dāng)采用全血、血漿等蛋白含量極高的樣本時,擴(kuò)增完畢后可能會有變性的蛋白沉淀,請離心后再進(jìn)行點(diǎn)樣和電泳。
儲 存:
長期儲存置于-20°C 以下,可保存 2 年;短期使用置于 4°C(3 個月)保存。

四、特別提示:
本公司的所有產(chǎn)品,僅可用于科研實(shí)驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

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