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021-54845833/15800441009
細胞信息
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細胞名稱 |
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細胞品牌 |
通蔚生物 |
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種屬來源 |
人 |
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組織來源 |
結腸 |
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生長特性 |
貼壁生長 |
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細胞形態(tài) |
上皮樣，多角形細胞 |
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細胞簡介 |
結腸在右髂窩內續(xù)于盲腸，在第3骶椎平面連接直腸。結腸分升結腸、橫結腸、降結腸和乙狀結腸4部，大部分固定于腹后壁，結腸的排列酷似英文字母“M”，將小腸包圍在內。結腸橫切面由內到外依次為：粘膜（上皮層，固有層，粘膜肌層），粘膜下層，肌層，外膜。其中上皮細胞主要位于粘膜層的上皮層，為單層柱狀上皮,含較多的杯狀細胞。結腸粘膜內有杯狀細胞，可分泌堿性液體，保護結腸粘膜，潤滑大便，以助排便。 |
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質量檢測 |
細胞角蛋白-18（CK-18）免疫熒光染色為陽性。，純度高于 90%，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等 |
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細胞規(guī)格 |
5x10?cells/T25或1mL凍存管 |
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培養(yǎng)基 |
人結腸粘膜上皮細胞專用培養(yǎng)基 |
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培養(yǎng)條件 |
氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃ |
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換液頻率 |
每2-3天換液一次 |
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消化液 |
0.25%胰蛋白酶 |
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細胞貨期 |
3-4周 |
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發(fā)貨方式 |
復蘇發(fā)貨（免運輸費用）/ 凍存發(fā)貨（需加干冰運輸費用） |
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供應范圍 |
僅限于科研實驗使用，絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用 |
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特別說明 |
具體操作步驟以隨貨產品說明書為主 |
細胞培養(yǎng)操作
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收貨處理 |
取出T25細胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2，飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài) |
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傳代密度 |
細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng) |
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傳代比例 |
首次傳代建議1：2傳代，1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 |
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傳代方法
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1. 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次； 2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化； 3. 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)； 4. 待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后每2-3天換液一次新鮮的完全培養(yǎng)基。 |
注意事項
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重要提醒 |
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。 2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。 3. 傳代培養(yǎng)過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。 4. 運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 |
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到貨須知 |
1. 收到細胞后，首先觀察并拍照記錄細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現象，干冰運輸的細胞檢查干冰是否完全揮發(fā)，細胞是否解凍，若有上述現象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。 2. 靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照（當天以及第 2,3 天請拍照），記錄細胞狀態(tài) (所拍照片將作為后續(xù)服務依據)；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。 3. 由于運輸的原因，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常現象。個別敏感細胞會出現不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。 4. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現問題，責任由客戶自行承擔。 |
售后服務
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細胞予重發(fā) |
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1. 細胞運輸中遭遇的各種問題，細胞丟失瓶身破損、培養(yǎng)液嚴重漏液等，重發(fā)。 |
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2. 收到細胞未開封，如出現污染狀況，重發(fā)。 |
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3. 收到細胞3天內，發(fā)現污染問題，經核實后，重發(fā)。 |
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4. 常溫發(fā)貨細胞靜置2小時后，干冰凍存發(fā)貨細胞復蘇2天后，絕大多數細胞未存活，經核實后，重發(fā)。 |
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5. 常溫發(fā)貨的細胞靜置22小時且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇2天后，出現污染經核實后，重發(fā)。 |
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6. 細胞活性問題在收到產品3天內提出真實實驗結果，用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，經核實后，重發(fā)。 |
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細胞不予重發(fā) |
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1. 客戶操作造成細胞污染，不重發(fā)。 |
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2. 客戶嚴重操作失誤致細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)。 |
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3. 非我們推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)。 |
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4. 細胞狀態(tài)不好，未提供真實清晰的培養(yǎng)前3天的細胞狀態(tài)照片，不重發(fā)。 |
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5. 細胞培養(yǎng)時經其它處理導致細胞出現問題的，不重發(fā)。 |
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6. 收到細胞發(fā)現問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的，不重發(fā)。 |
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特別說明 |
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上海通蔚生物客戶在細胞培養(yǎng)過程中，有任何技術問題可以撥打免費服務電話021-54845833或15800441009，我們隨時給予實驗中的免費解答。 |
