簡介
樣品收集后若在 1 周內進行檢測的可保存于4℃,若不能及時檢測,請按一次使用量分裝,凍存于-20℃(1個月內檢測),或-80℃(6個月內檢測),避免反復凍融,標本溶血會影響最后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。
試劑盒中取出標準品,準備7個試管,先從20ng/mL標準品(200μL)按需吸取一定量用1×稀釋液稀釋至1000pg/mL(例:50μL的標準品母液+950μL的1×稀釋液,制備得到1000μL的1000pg/mL濃度標準品),隨后在6個試管中分別加入500μL的1×稀釋液,在這6個單獨的試管中將1000pg/mL標準品依次2倍倍比稀釋至6個梯度,共配制7個濃度的標準品,依次為: 1000pg/mL、 500pg/mL、 250pg/mL、 125pg/mL、 62.5pg/mL、 31.25pg/mL、 15.63pg/mL,從最高濃度標準品溶液中吸取500μL標準品到下一個試管中,輕輕吹打混勻,以此類推進行標準品的倍比稀釋(如圖所示),1×稀釋液用作零濃度標準品(0pg/mL)。

抗體工作液配置
使用前10分鐘,將100×生物素化抗體于1000×g離心1分鐘,隨后用1×稀釋液將100×生物素化抗體稀釋成1×生物素化抗體工作液,根據所需用量當日配置當日使用。
以下數據和曲線僅供參考,實驗者需根據自己的實驗數據建立標準曲線。
標準品濃度(pg/mL) |
1000 |
500 |
250 |
125 |
62.5 |
31.25 |
15.63 |
0 |
OD值 |
2.587 |
1.728 |
1.048 |
0.656 |
0.442 |
0.278 |
0.194 |
0.055 |
校正OD值 |
2.532 |
1.673 |
0.993 |
0.601 |
0.387 |
0.223 |
0.139 |
0 |
下圖所示標準曲線僅供示例,結果計算應以同次試驗標準品所繪標準曲線為準計算樣本結果
重復性
經樣本測試,本試劑盒的檢測靈敏度為7.82pg/mL。
其他相關蛋白在稀釋緩沖液中制備為50ng/mL,并測定交叉反應性。沒有觀察到明顯的交叉反應。
使用ELISA試劑盒之前,請您必須完整閱讀說明書,本產品僅供科研使用,不能于臨床診斷或治療。