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021-54845833/15800441009
昆蟲(chóng)卵巢細(xì)胞
基本形態(tài) : 上皮細(xì)胞樣
培養(yǎng)條件 : Grace＇s Insect Medium (GIMw/o BSA, FCS, Whole EggUltrafiltrate) 10%FBS
生長(zhǎng)特性 : 貼壁/懸浮混合生長(zhǎng)
培養(yǎng)環(huán)境 : 28℃，100%AIR
備 注 : 該細(xì)胞系源于雌性草地貪夜蛾蛹的卵巢組織，可以用于復(fù)制桿狀病毒表達(dá)載體
T25 細(xì)胞到貨處理
觀察：
1、收到細(xì)胞后，請(qǐng)及時(shí)核對(duì)培養(yǎng)瓶上標(biāo)注的細(xì)胞名稱(chēng)是否與訂購(gòu)的細(xì)胞名稱(chēng)一致以及培養(yǎng)瓶是否有破損或漏液等異常情況。
處理：
1、75%酒精棉球擦拭 T25 細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部。
2、顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存(40x,100x,200x 各一張)前三天照片為重要售后依據(jù)，不提供照片默認(rèn)收到狀態(tài)良好。
3、不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞放入 28 度培養(yǎng)箱中靜置 3-4 小時(shí)后再做處理，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
4、收到細(xì)胞后，及時(shí)查看說(shuō)明書(shū)是貼壁細(xì)胞還是懸浮細(xì)胞形態(tài)，并按常規(guī)貼壁或懸浮細(xì)胞的傳代方法操作。
貼壁：
未超過(guò) 80%匯合度時(shí)，將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，留 5ml 完全培養(yǎng)基，放入 28℃ 孵箱培養(yǎng)；超過(guò) 80%匯合度時(shí)，根據(jù)情況傳代或者凍存，具體操作見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)步驟。首次傳代，建議 1:2 傳代（兩個(gè) T25）。（傳代時(shí)建議一瓶用原瓶里面的完全培養(yǎng)基，另外一瓶用自己配的完全培養(yǎng)基，進(jìn)行對(duì)比培養(yǎng)。）
特殊細(xì)胞注意事項(xiàng)：
個(gè)別細(xì)胞貼壁不牢，在運(yùn)輸過(guò)程中發(fā)生細(xì)胞脫落，這是正常現(xiàn)象。請(qǐng)將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管，1000rpm 離心 5min，收集上清（后期對(duì)比培養(yǎng)使用），沉淀加入胰酶 1-2ml，輕輕吹打，重懸，消化至細(xì)胞滑落后，加 5ml 完全培養(yǎng)基終止反應(yīng)。再離心，棄上清，加 1-2ml 完全培養(yǎng)基重懸。然后按 1:2 比例進(jìn)行分瓶傳代（兩個(gè) T25），補(bǔ)充新的完全培養(yǎng)基至 5-8ml/瓶，最后放入 28℃，100%AIR 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
