通蔚生物RL1大鼠肺成纖維樣細(xì)胞傳代步驟

1. 吸出原培養(yǎng)液。
2. 加入2ml左右PBS，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤洗細(xì)胞,吸出PBS丟棄。
3. 加入1ml左右0.25% 胰蛋白酶溶液（含ED TA ），輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細(xì)胞。
4. 放入培養(yǎng)箱消化，顯微鏡下看到細(xì)胞塊中間的細(xì)胞明顯變圓有間隙時(shí)可終止，全程不要拍打培養(yǎng)瓶。
5. 加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，吹打細(xì)胞使之脫壁并在液體里反復(fù)吹打使細(xì)胞盡量呈單顆細(xì)胞的懸浮液。
6. 收集細(xì)胞懸液離心，1200rpm /min 3分鐘，離心完吸出上清丟棄。
7. 加入新鮮培養(yǎng)基，吹打幾下混勻細(xì)胞即可，按比例接種到新培養(yǎng)瓶，補(bǔ)足培養(yǎng)基，擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進(jìn)行培養(yǎng)。
傳代比例（密度） ：1:2-1:3
換液頻次 ：2~ 3次/周
細(xì)胞背景描述
RL1細(xì)胞是來源于一大鼠的肺組織，2007年由中國科學(xué)院昆明細(xì)胞庫建立。
細(xì)胞類型 ：有限細(xì)胞系
細(xì)胞保藏中心 ：RCB；RC B2784
收到常溫細(xì)胞后如何處理
細(xì)胞培養(yǎng)詳細(xì)操作步驟請(qǐng)參照通蔚生物細(xì)胞培養(yǎng)操作指南
1. 收到常溫細(xì)胞后，及時(shí)拍照記錄有無漏液/瓶身破損現(xiàn)象。
2. 用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4. 靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片 將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5. 若觀察到異常或者對(duì)細(xì)胞有疑問，請(qǐng)及時(shí)跟我們聯(lián)系；對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)操作及培養(yǎng)?？筛覀兊募夹g(shù)支持交流。

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