在蛋白質檢測實驗中,抗體選擇是決定研究結果的關鍵因素。如果所選抗體質量低下,實驗的可重復性可能會降低。因此,選擇合適的抗體不僅對于減少實驗時間和成本至關重要,而且對于提高結果的可靠性也至關重要。
本文將講解抗體選擇的關鍵點,希望這些信息能對您的日常實驗有所幫助。
了解抗體選擇的基礎知識
抗體僅僅與靶標結合是不夠的。需要根據實驗目的選擇合適且可靠的產品。我們將從五個方面講解其中的關鍵點。
1.驗證與目標的交叉反應
在尋找針對目標蛋白的抗體時,檢查反應性非常重要。反應性是指已確認抗體能與哪些動物種屬發生反應,是抗體目錄中始終列出的信息之一。請務必檢查您使用的動物種屬是否包含在內。
2.多克隆抗體和單克隆抗體的選擇
普通抗體產品大致分為兩類:可與抗原中多個表位反應的多克隆抗體,以及與特定表位反應的單克隆抗體。有關每種類型的特性和推薦用途,請參閱以下文章。
3.考慮宿主物種和同型
選擇二抗時,需要檢查宿主物種和亞型。宿主物種是指用于產生抗體的動物物種。選擇二抗時,需要選擇能夠與所用一抗的動物物種結合的二抗。
同型也稱為類別,在哺乳動物中有五種:IgA、IgD、IgE、IgG和IgM。由于大多數二抗識別特定的同型,因此需要選擇與實驗中使用的一抗同型相匹配的二抗。
4.查看適用應用程序和使用歷史記錄
一些抗體已針對特定應用進行驗證,例如蛋白質印跡法(WB)、免疫組織化學(IHC)和流式細胞術(FACS)。如果您在特定實驗中使用常用抗體未獲得良好結果,請考慮尋找適合您應用的抗體。
5.檢查驗證數據
關于第4點,為了選擇合適的抗體,務必查看制造商發布的驗證數據。如果產品說明書或網頁包含驗證抗體性能和特異性的實驗結果,則值得信賴。產品介紹頁面上引用的論文也是重要的信息來源。
如何有效地找到抗體
1.使用專門的搜索引擎
就像PubMed用于搜索研究論文一樣,也有專門的抗體服務,你可以在此網站進行檢索。搜索抗體時,輸入目標蛋白或產品名稱,該抗體的搜索結果將按論文被引用次數的順序顯示。
另一個推薦的搜索服務是Antibodypedia。該服務也允許您搜索抗體信息和引用論文,并可輕松查看實驗結果圖像。CiteAb和Antibodypedia都允許您根據用途(例如WB或FACS)縮小搜索范圍。
2.參考評論和論文
實際使用過該產品的研究人員的評價是選擇抗體時的重要信息來源。除了論文描述外,您還可以在上述搜索服務以及制造商網站的評論區找到研究人員的真實意見。在比較產品時,請務必參考這些意見。
3.比較不同供應商
當不同供應商銷售類似抗體時,您需要根據數據表和驗證實驗,仔細考慮它們是否適合您的目的。抗體選擇基本要點部分中列出的要點會對您的實驗結果產生重大影響,因此請務必仔細檢查。咨詢制造商的技術支持,了解適合您預期用途的抗體也是非常有效的。
抗體對實驗的結果至關重要,它會影響實驗結果可靠性,大家可以參考上述方法來選擇抗體。如果您對抗體選擇還有疑問,可以詢問上海通蔚生物在線客服進一步尋求幫助來選擇合適的抗體。